亚洲小说网,无码人妻一区二区三区免费,又大又大粗又长又硬又爽,久久婷婷人人澡人人喊人人爽,成人免费av片在线观看

您好，歡迎來(lái)到上海撫生實(shí)業(yè)有限公司！
400-990-7709 / 021-52961052（工作日9:00-18:00）
  1. 首頁(yè)
  2. 產(chǎn)品中心
  3. 生化試劑盒
  4. 信號(hào)系列
漆酶測(cè)試盒（比色法）
AS6321354
貨號(hào) 純度 規(guī)格 目錄價(jià) 會(huì)員價(jià) 庫(kù)存 數(shù)量 購(gòu)買(mǎi)
AS6321354-100管/48樣 100管/48樣 ￥900.00 登錄查看
AS6321354-50管/24樣 50管/24樣 ￥480.00 登錄查看
產(chǎn)品詳情

漆酶（Laccase）試劑盒說(shuō)明書(shū)

                                                微量法 100T/48S

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。

測(cè)定原理

漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS，測(cè)定ABTS自由基的增加速率，可計(jì)算得漆酶活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體30mL×1瓶，4℃保存。

工作液：粉劑×1瓶，4℃避光保存，臨用前加15mL試劑一溶解；用不完的試劑4℃保存一周。

酶液提取

  1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。12000g 4℃離心30min，取上清，置冰上待測(cè)。
  2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
  3. 細(xì)胞培養(yǎng)液：直接檢測(cè)。

測(cè)定操作表

 

對(duì)照管

測(cè)定管

樣本（μL）

45

45

試劑一（μL）

255

 

工作液（μL）

 

255

60℃水浴20min后冷卻至室溫，取200μL反應(yīng)液于微量石英比色皿/96孔板中測(cè)定420nm處吸光值A(chǔ)，△A=A測(cè)定管-A對(duì)照管

注意：

  1. 極少數(shù)樣本在60℃水浴20min后會(huì)出現(xiàn)沉淀，可經(jīng)過(guò)8000g 25℃離心10min后，取上清檢測(cè)，例如成熟的水稻葉片樣本。
  2. 為確保檢測(cè)準(zhǔn)確性，若ΔA大于1，將樣本用提取液稀釋2~10倍后重新檢測(cè)，計(jì)算公式乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 

 

 

 

 

 

 

酶活性計(jì)算公式

a．用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1．按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

漆酶活性（nmol/min /mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 9.26×△A÷Cpr

2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義：每克樣品每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

漆酶活性（nmol/min /g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T= 9.26×△A÷W

3．按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

漆酶活性（nmol/min /104 cell）= ×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）÷T= 9.26×△A÷細(xì)胞數(shù)量

4．按照液體體積計(jì)算

酶活性定義：每升培養(yǎng)液每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

漆酶活性（nmol/min /L）= ×V反總÷V樣÷T= 9260×△A

ε：ABTS毫摩爾消光系數(shù)：36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.3mL；V樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.03mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，20min

b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

1．按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

漆酶活性（nmol/min /mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18.52×△A÷Cpr

2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義：每克樣品每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

漆酶活性（nmol/min /g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T= 18.52×△A÷W

3．按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

漆酶活性（nmol/min /104 cell）= ×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）÷T

= 18.52×△A÷細(xì)胞數(shù)量

4．按照液體體積計(jì)算

酶活性定義：每升培養(yǎng)液每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

漆酶活性（nmol/min /L）= ×V反總÷V樣÷T= 18520×△A

ε：ABTS毫摩爾消光系數(shù)：36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.3mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.045mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，20min

 

相關(guān)產(chǎn)品
總皂苷含量測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321368 規(guī)格：100管/96樣
高鐵還原酶（FCR）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321366 規(guī)格：100管/96樣
亞鐵氧化酶（HP）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321365 規(guī)格：100管/96樣
肉桂酸4羥化酶（C4H）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321364 規(guī)格：100管/96樣
莽草酸脫氫酶（SD）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321363 規(guī)格：100管/96樣
水溶性氯化物測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321362 規(guī)格：50管/48樣
木質(zhì)素含量測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321361 規(guī)格：100管/96樣
木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（LiP）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321360 規(guī)格：100管/96樣
錳過(guò)氧化物酶（MnP）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321359 規(guī)格：100管/96樣
脫氫酶(DHA)測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321357 規(guī)格：100管/96樣
植酸含量測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321356 規(guī)格：100管/96樣
植酸酶測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321355 規(guī)格：100管/48樣
漆酶測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321354 規(guī)格：100管/48樣
甜菜堿含量測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321352 規(guī)格：100管/96樣
單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321351 規(guī)格：100管/96樣
乙酸激酶（ACK)測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321350 規(guī)格：100管/96樣
4香豆酸：輔酶A連接酶（4CL)測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321349 規(guī)格：100管/96樣
肉桂醇脫氫酶（CAD)測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321348 規(guī)格：100管/96樣