注
意：正式測(cè)定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
果膠甲酯化程度(PMD)決定了負(fù)電荷數(shù)量，這與植物根系細(xì)胞壁吸附重金屬，抵御重金屬毒害密切相
關(guān)。細(xì)胞壁果膠含量和甲酯化程度影響著植物細(xì)胞壁對(duì)重金屬毒害的抵御能力。
果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇，甲醇在醇氧化酶作用下生成甲醛，接著與 2,4-戊二酮反應(yīng)顯色，
該有色物質(zhì)在 412nm 下有特定吸收峰；同時(shí)半乳糖醛酸在硫酸溶液中與咔唑進(jìn)行縮合反應(yīng)生成紫紅色物
質(zhì)，該有色物質(zhì)在 530nm 處有特征吸收峰。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值計(jì)算得到果膠甲酯化
程度（PMD）。
所需的儀器和用品：
酶標(biāo)儀、96 孔板、水浴鍋、可調(diào)式移液器、乙醇、濃硫酸、研缽。
試劑盒組成和配制：
提取液：液體 120mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 2mL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 12mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：液體μL×2 支，-20℃保存，用前輕甩幾下使液體落入底部，再加 0.56mL 試劑三混勻溶解，
分裝-20℃凍存，禁止反復(fù)凍融。
試劑五 A：液體μL×2 支，4℃保存；
試劑五 B：透明 8mL ×4 空瓶，臨用前吸取 7mL 的試劑六至一瓶試劑 B 中，再吸取 15μL 的試劑 A
至試劑 B 中，混勻溶解做為試劑五備用。
試劑六：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；
試劑七：液體 3mL×1 支，4℃保存；
果膠甲酯化程度(PMD)檢測(cè)：
一、樣本制備：
1、 取 0.1g 組織樣本，加 1mL 的 80%乙醇，研磨勻漿，轉(zhuǎn)移至 EP 管中，靜置 10 分鐘后于 4°C
下 8000rpm 離心 10min，棄上清留沉淀。
2、 向沉淀中加入 1mL 的 80%乙醇，混勻，靜置 10 分鐘后于 4°C 下 8000rpm 離心 10 min，
棄上清留沉淀。
3、 再向沉淀中加入 1 mL 提取液，混勻，沸水浴 1 小時(shí)，流水冷卻至室溫，8000rpm，4℃離心 10min，
棄沉淀，取上清液即樣本待測(cè)。
檢測(cè)步驟：
一、待檢液制備
二、甲醇生成量測(cè)定：
1、 打開(kāi)酶標(biāo)儀，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 412nm；
2、 在 EP 管中依次加入：
2、 在 EP 管中依次加入：
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