| 貨號 | 純度 | 規(guī)格 | 目錄價 | 會員價 | 庫存 | 數(shù)量 | 購買 |
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| A-PJ1011-100Tx25μl | 100Tx25μl | 100Tx25μl | ￥3822.00 | 登錄查看 |
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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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Bst 4.0 SYBR Green Bead |
100T(25μl體系) |
A-PJ1011 |
描述：
該制品為全體系凍干微球制品，內(nèi)含恒溫擴(kuò)增所用的反應(yīng)緩沖液、SYBR Green 熒光染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等，使用時只需要加入引物、模板即可進(jìn)行核酸恒溫擴(kuò)增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性（逆轉(zhuǎn)錄），還具有依賴于 DNA 的聚合酶活性，因此無論 DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進(jìn)行恒溫擴(kuò)增。該制品是進(jìn)行 LAMP 及RT-LAMP 擴(kuò)增反應(yīng)的絕佳試劑。
SYBR Green 系列產(chǎn)品為實時熒光檢測的專用試劑，可直接在恒溫?zé)晒鈨x或定量 PCR 以上進(jìn)行 LAMP 反應(yīng)擴(kuò)增。
儲存：-20℃保存 2 年；室溫（25℃）保存>6 個月。
使用凍干微球進(jìn)行全擴(kuò)增體系用品的制備方法：將優(yōu)化的擴(kuò)增引物分裝于 0.2 ml EP 管底部，于 70-80℃條件烘干1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已經(jīng)含有干燥的擴(kuò)增引物，再加入一粒凍干微球即可制備成全擴(kuò)增體系干燥品，該干燥品無需冷鏈運輸，可長期保存。
反應(yīng)體系說明：每一個凍干微球為按照 25 μl 反應(yīng)體系建立，在使用時只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可進(jìn)行反應(yīng)。
使用實例，進(jìn)行 LAMP 熒光擴(kuò)增
1. 配制熒光 LAMP 反應(yīng)體系在 0.2 ml EP 反應(yīng)管中加入下述試劑
Bst 4.0 SG Bead 1 粒
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到液體總量 25 μl
10xLAMP Primer Mix 濃度：FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分別為 4-8 μM、F3/B3 分別為 2 μM。
2. 反應(yīng)體系配好后，置于熒光定量 PCR 儀中于 65°C進(jìn)行反應(yīng) 15~30min。1min 收集一次熒光信號。讀取擴(kuò)增曲線進(jìn)行陰性和陽性判讀。
3. 根據(jù)熒光擴(kuò)增曲線判讀陽性和陰性。
注意事項：
（1）關(guān)于礦物油的使用，在配制完 LAMP 反應(yīng)體系后，可加入一滴礦物油覆蓋于反應(yīng)液上部，可以有效的減少氣溶膠的污染。實驗證明礦物油并不影響機(jī)器的熒光數(shù)值讀取。
（2）關(guān)于擴(kuò)增曲線的異常：由于 LAMP 擴(kuò)增速度較快，熒光信號讀取可能存在矯正計算問題，這與熒光設(shè)備的軟件算法有管。在有些熒光 PCR 儀上，在相對熒光模式下，表現(xiàn)出曲線飛峰、終點曲線下降的問題。此時調(diào)整到原始熒光值模式下觀察結(jié)果，或致電相應(yīng)設(shè)備供應(yīng)商進(jìn)行咨詢。
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資料/datasheet
