公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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Sybr Green I 20× for PCR(熒光信號增強(qiáng)劑)
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1ml
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A-Hc2140
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儲存條件: -20°C保存。
產(chǎn)品介紹:
SYBR Green I與dsDNA 結(jié)合熒光信號可增強(qiáng)800~1000倍。在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR Green I熒光染料,它特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,熒光信號增強(qiáng),而不摻入鏈中的SYBR Green I染料分子熒光不變,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。
熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。
1.使用濃度對熒光PCR結(jié)果的影響
SYBR Green I的使用濃度是保證熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)成功非常關(guān)鍵的因素。如果SYBR Green I的濃度過低會使熒光信號的變化降低,這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出。而在高濃度時,將會抑制PCR反應(yīng),降低PCR反應(yīng)效率。所以一般在使用SYBR Green I時應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化使用濃度,反應(yīng)的終濃度為1×到0.2×之間。
2.Mg2+濃度的影響
提高M(jìn)g2+濃度可以降低SYBR Green I對PCR反應(yīng)的抑制作用。我們建議在用SYBR Green I進(jìn)行熒光PCR反應(yīng)時,Mg2+濃度比無SYBR Green I 的普通 PCR 反應(yīng)高出0.5~3mM。