細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),而且細(xì)胞一旦離開活體開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的。
在復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是由堿基互補(bǔ)配對(duì)原理完成的。CR需要模板和酶,每一次循環(huán)都需要。酶的數(shù)量是固定的,但模板在每一次的延伸就一次用完就沒了。PCR反應(yīng)參數(shù)包括變性溫度和時(shí)間、復(fù)性溫度和時(shí)間、延伸溫度和時(shí)間、循環(huán)數(shù)四方面,在PCR反應(yīng)過程中都發(fā)揮著至關(guān)重要作用。