土壤木質(zhì)素過氧化物酶（Soil lignin peroxidase，S-Lip）試劑盒說明書
微量法100T/48S
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
木質(zhì)素過氧化物酶（EC1.11.1.14）是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶，屬于木質(zhì)素降解酶系，在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應用潛力。
測定原理
木質(zhì)素過氧化物酶氧化藜蘆醇生成藜蘆醛，在310nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。
試劑組成和配制
試劑一：液體25mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體15mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存。
樣品處理
新鮮土樣風干，過30-50目篩。
測定操作
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對照管 |
測定管 |
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土樣（g） |
0.04 |
0.04 |
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甲苯（μL） |
30 |
30 |
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25℃靜置15min |
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試劑一（μL） |
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200 |
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蒸餾水（μL） |
200 |
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試劑二（μL） |
120 |
120 |
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試劑三（μL） |
80 |
80 |
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30℃震蕩反應3h，冰浴5min，12000g，4℃離心10min，取上清200μL，于微量石英比色皿/96孔板(UV)板，測定310nm處吸光值，分別記為A對照和A測定，△A=A測定- A對照 |
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酶活計算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位。
S-LiP活性（nmol/d /g 土樣）= 
×V反總÷W÷T= 344×△A÷W
ε：藜蘆醛摩爾消光系數(shù)：9300L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應總體積，0.4mL； W：樣本質(zhì)量，g；T：反應時間，3h
酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位。
S-LiP活性（nmol/d /g 土樣）= 
×V反總÷W÷T= 688×△A÷W
ε：藜蘆醛摩爾消光系數(shù)：9300L/mol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應總體積，0.4mL； W：樣本質(zhì)量，g；T：反應時間，3h
掃描二維碼
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資料/datasheet
